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(来学网)
酶偶联法测定碱性磷酸酶活性浓度时,A405rm/min为0.108,摩尔吸光系数(ε)为6.2×10^3/L,血清用量20μl,底物量250μl,比色杯为1.00cm。酶活性浓度的值为
A.
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234
B.
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20
C.
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71
D.
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25
E.
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6.2
正确答案:
A
答案解析:
酶活性浓度单位的计算:用连续监测法进行酶活性测定时,不需作标准管或标准曲线,根据摩尔吸光系数很容易计算酶活性浓度。摩尔吸光系数(e)的定义为:在特定条件下,一定波长的光,光径为1.00cm时,通过所含吸光物质的浓度为1.00mol/L时的吸光度。如用连续监测法测定在线性范围内每分钟吸光度的变化(△A/min),以U/L表示酶活性浓度时,则可按下式进行计算:
公式中:V反应体系体积(ml)、ε摩尔消光系数(cm^2/mol)、v样品量(ml)、L比色杯光径(cm)、△A吸光度变化、10^6为将mol换算成μmol。
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