半固体培养基是在液体培养基中加入0.2%～0.5%的琼脂制成，可用于观察细菌的动力、菌种鉴定、测定噬菌体的效价及菌种的短期保存。用接种针将细菌穿刺接种于半固体培养基中，如细菌无动力（无鞭毛），则沿此穿刺线生长，而周围培养基清澈透明；如细菌有鞭毛，能运动，可由穿刺线向四周扩散呈放射状或云雾状生长。