使用密闭的高压蒸汽灭菌器，压力调：103.4Pa（1.05kg/cm3），器内温度可达121.3℃，维持15～20分钟，可杀死包括细菌芽孢在内的所有微生物，所以高压蒸汽灭菌法是一种最有效的灭菌方法。常用于一般培养基、生理盐水、手术器械和敷料等耐高温、耐湿物品的灭菌，也用于污物和排泄物等的灭菌。