在菌斑成熟过程中，细菌定植有一定的顺序，首先吸附到牙面的是革兰氏阳性球菌、链球菌例如血链球菌占优势，然后是丝状菌、放线菌，以后随着菌斑的成熟，细菌种类逐渐增多，菌斑大小和厚度随之增加，革兰氏阴性厌氧菌、能动菌和螺旋体如月形单胞菌、真杆菌、密螺旋体和梭形杆菌等比例上升。一般12小时的菌斑便可被菌斑染色剂显示，9日后便形成各种细菌的复杂生态群体，10～30日的菌斑发展成熟达高峰。