硝酸盐还原试验是根据某些细菌能还原硝酸盐为亚硝酸盐，亚硝酸盐与醋酸作用，生成亚硝酸，亚硝酸与试剂中的对氨基苯磺酸作用生成重氮基苯磺酸，后者与α-萘胺结合生成N-α萘胺偶苯磺酸的原理进行的试验方法。软下疳的致病菌是杜克雷嗜血杆菌，能够将硝酸盐或亚硝酸盐还原为氮。软下疳的生化检查结果为硝酸盐还原试验阳性。