结核分支杆菌为专性需氧，3%～5%CO能促进生长。营养要求较高，必须在含血清、卵黄、马铃薯、甘油及含某些无机盐类的特殊培养基上才能生长良好。典型菌落为粗糙型，表面干燥呈颗粒状，液体培养时形成菌膜。结核分支杆菌因胞壁含大量脂类故对理化因素抵抗力较强。耐干燥，在干燥的痰内可存活6～8个月。耐酸，在3%的HCl或6%HSO中不被杀死。